江蘇吉泰肽業(yè)科技有限公司
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研究多肽結(jié)構(gòu)的主要目的是解釋其氨基酸組成和序列是否正確,如果多肽分子中含有胱氨酸,則應(yīng)澄清其狀態(tài)(氧化態(tài)或還原態(tài)),并確定含有多種半胱氨酸的多肽的正確的二硫鍵連接位點。對于某些長肽,可能還需要利用核磁共振(NMR)、圓二色譜等方法來研究它們的空間結(jié)構(gòu)(如二級和三級結(jié)構(gòu))。
對于短肽,元素分析、紅外光譜、核磁共振波譜、氨基酸組成分析、質(zhì)譜等常用方法有時足以解釋它們的結(jié)構(gòu)特征。如果從上述測試中獲得的信息難以合理分析和分配,則應(yīng)進行氨基酸測序。
中、長肽應(yīng)進行氨基酸組成和氨基酸序列分析。氨基酸序列的一般方法是Edman降解,這是測定N-末端氨基酸的化學(xué)方法?;诳焖僭愚Z擊、電噴霧、場分析和激光分析質(zhì)譜等多種技術(shù)的質(zhì)譜技術(shù)可以提供多肽的分子量和序列信息,是對Edman降解的良好補充。
對于含有20多個氨基酸殘基的肽,如果不能直接確定其序列,則可根據(jù)肽的分子量和氨基酸組成的特點,利用特定的蛋白水解酶將其分解成小片段,然后對每個小片段的序列進行分析。
當肽含有非天然氨基酸和氨基酸衍生物時,應(yīng)在結(jié)構(gòu)研究中加以證實。此時,應(yīng)在相應(yīng)的研究中研究這些非天然氨基酸和氨基酸衍生物的色譜行為。